Aumento dos níveis de LDLox induzem maior formação de células espumosas in vitro / Increased levels of oxLDL induce higher foam cells formation in vitro

Inúmeras evidências sustentam a hipótese de que a modificação oxidativa da LDL contribui para o desenvolvimento e progressão da aterosclerose em uma variedade de modelos animais e que as células espumosas constituem um evento crucial no desenvolvimento da lesão aterosclerótica. A LDL oxidada tem uma ação quimioatraente sobre os monócitos, induzindo a transformaçãode macrófagos em células espumosas. Neste trabalho, foi desenvolvido um protocolo simples e reproduzível de cultura de células mononucleares humanas, o qual foi utilizado para avaliação da capacidade aterogênica da LDL oxidada comparada à LDL nativa naformação de células espumosas com ativação espontânea dos macrófagos. A partir do sangue de 10 indivíduos normolipidêmicos, obteve-se a LDL por processo de ultracentrifugação sendo a mesma oxidada in vitro na presença de íons cobre. Monócitos diferenciaram-se em macrófagos e foram incubados com LDL nativa e oxidada em diferentes concentrações. Houve formação decélulas espumosas apenas em macrófagos estimulados com LDL oxidada, variando quantitativamente de acordo com a sua concentração.Concluiu-se que este protocolo de estudo, além de possibilitar a utilização de macrófagos humanos, permitiu a redução do tempo de incubação da cultura. Paralelamente, demonstrou-se que a formação de células espumosas é dependente da extensão do grau deoxidação da LDL

Much evidence sustains the hypothesis that oxidative modification of low-density lipoprotein (LDL) contributes to the development and progression of atherosclerosis and that foam cells constitute a crucial event in the development of the atheroscleroticlesion. Oxidized LDL (oxLDL) presents a chemotatic action on monocytes, inducing the transformation of macrophages into foam cells. In this work, a simple reproducible protocol for culturing human mononuclear cells was developed to evaluate the atherogeniccapacity of oxLDL compared to native LDL in the formation of foam cells. Monocytes differentiate into macrophages when stimulatedwith native and oxidized LDL at different concentrations. Foam cell formation only occurred in macrophages stimulated by oxLDL, which varied quantitatively according to its concentration. This study protocol, besides making the use of human macrophages possible, permitted a reduction in culture incubation time. Moreover, the study demonstrated that foam cell formation is dependent on the degree of LDL oxidation

Efeitos do ramipril, captopril e sinvastatina na injúria da preservação a frio de rins de ratos / Effects of ramipril, captopril, and simvastatin on cold-storage damage in rat kidneys

Introdução: A preservação a frio geralmente é utilizada para minimizar a injúria renal durante a preservação. Testamos se a adição de sinvastatina, captopril, e ramipril à solução de Euro-Collins (EC) ou o pré-tratamento de rins de ratos doadores com ramipril e/ou sinvastatina poderia reduzir a injúria da preservação renal. Métodos: Inicialmente, adicionamos ramipril e sinvastatina à solução de EC, contendo fragmentos de rins de ratos que foram preservados a frio por 24 horas (n=6). O dano tecidual foi avaliado pela liberação de desidrogenase lática (DHL). In vivo, ramipril, por gavagem, e/ou sinvastatina, intraperitonealmente, foram administrados aos ratos doadores 18h antes da nefrectomia.Fragmentos renais foram estocados a frio em EC durante 24h ou 48h. O dano tecidual foi avaliado, utilizando a liberação de DHL, substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), teste do MTT e pelo exame morfológico após 0, 24, e 48h (n=10). Concomitantemente, captopril foi acrescentado à solução de EC e fragmentos adicionais dos rins de ratos controles foram estocados a frio durante 24h e 48h, com dano tecidual avaliado por liberação de DHL e exame histológico. Resultados: A adição de ramipril e sinvastatina à solução de EC não afetou a viabilidade dos fragmentos renais (p>0,05). A adução de captopril na solução de EC também não melhorou a viabilidade durante a preservação a frio, avaliada pela liberação de desidrogenase lática e pelo escore histológico (p>0,05). O pré-tratamento dos doadores renais com ramipril e/ou sinvastatina não alterou significativamente o MTT, MDA, DHL ou escores histológicos. Discussão: Inibidores da ECA e estatinas protegem contra a injúria da isquemia-reperfusão (I/R) após pré-tratamento por alguns dias e reduzem o estresse oxidativo e marcadores inflamatórios e poderiam melhorar a capacidade antioxidante da solução de EC...

Background: Cold storage is generally used to minimize kidney injury during preservation. We tested whether or not addition of simvastatin, captopril, and ramipril in the Euro-Collins solution (EC) or pre-treatment of rat kidney donors with ramipril and/or simvastatin reduced preserved kidney injury.Methods: We first added ramipril and simvastatin to EC with rat kidney fragments that were cold-stored for 24 hours (n=6). Tissue damage was assessed by lactate dehydrogenase (LDH). In vivo, ramipril, by gavage, and/or intraperitoneal simvastatin , were administered to donor rats 18h before nephrectomy. Kidney fragments were cold-stored in EC for 24h or 48h. Tissue damage was assessed by LDH release, TBARS, MTT-assay, and by morphologic assessment at 0, 24, and 48h (n=10). Concomitantly, captopril was added to EC and additional fragments of control rat kidneys were coldstored for 24 and 48h, with damage assessed by LDH release and histology. Results: The addition of ramipril and simvastatin to EC solution did not change the viability of rat kidney fragments (p>0.05). The addition of captopril in the EC solution also did not improve cold-storage viability, as assessed by LDH release levels and histological scores (p>0.05). Pre-treatment of kidney donors with ramipril and/or simvastatin did not significantly change MTT, MDA, LDH levels or histological scores.Discussion: ACEIs and statins protect against organ I/R injury after donor pre-treatment for a few days and reduce oxidant stress and inflammatory markers, and could improve the antioxidant capacity of EC solution. In the tested concentrations, inclusion of captopril, ramipril, and simvastatin in the EC solution did not improve the preservation quality of cold-stored rat kidney fragments...